HJ-2型黃曲梅素測定儀操作步驟

一、 工作原理

本裝置采用薄層層析方法，樣品中黃曲梅毒素B1經(jīng)提取濃縮薄層分離后，在波長365nm紫外光下產(chǎn)生紫色熒光，根據(jù)其在薄層上顯示熒光的低檢測量來測定含量。

二、 技術(shù)參數(shù)

檢測樣品：糧食、飲料、水果、肉類、魚蝦類發(fā)酵產(chǎn)品；

低檢測量：0.0004微克；

工作電壓：交流220V，50Hz；

烘板器：加熱面積220mmX200mm，功率600W

        重量6kg，

        外形尺寸：270mmX235mmX150mm；

點(diǎn)樣器：點(diǎn)樣直徑<3mm，

        工作尺寸：200mmX200mm，

        重量8kg，

        外形尺寸：280mmX245mmX315mm；

觀察箱：紫外光波365nm，功率12W，

        重量11kg，

        外形尺寸：300mmX310mmX445mm。

三、 操作方法

1、 準(zhǔn)備工作

(1) 薄層板的制備：薄層板一般采用表面光滑的玻璃板在板面上涂有一層0.25-0.5mm的吸附劑而成。玻璃板要求厚度均勻，平整、清潔（薄層板無規(guī)格，常用5×15，8×15，10×20，20×20等規(guī)格）。

將準(zhǔn)備的薄層板洗滌清潔后、風(fēng)干或烘干。制板前用浸有乙醇的脫脂棉擦凈。

(2) 調(diào)漿：調(diào)漿是薄層板是否能制成功的關(guān)鍵，吸附劑用量根據(jù)制備厚度來確定，一般厚度為0.258-0.3mm，5×15cm板需吸附劑1克，8×15cm板需1.5-1.6克。取吸附劑一份于小型研缽中加二份水迅速研磨，研磨后再加一份水繼續(xù)研磨（或一次加足），當(dāng)漿液開始調(diào)稠時(shí)，立即涂布（加CMC可一次涂若干塊）。漿吸附劑均勻地鋪在玻璃板上。

2、 活化：活化的作用是調(diào)節(jié)吸附劑的含水量，以得到適宜的活性，將涂布好的薄層板待自然晾干后，放入烘箱內(nèi)，溫度調(diào)節(jié)到100℃左右，置二小時(shí)，將薄層板取出，置入干燥器中備用，三天后要把薄層板重新活化或臨用前放在烘板器上活化20-30分鐘（溫度控制在80℃），即可適用。

3、 點(diǎn)樣：使點(diǎn)樣液滴在制好的薄層板上，把微量注射器（常用規(guī)格0.5、1.5、10、100微升，可根據(jù)需要選用）固定在點(diǎn)樣器的固定架上，即可上、下、左、右點(diǎn)樣。微量注射器是薄層點(diǎn)樣常用的工具，洗滌是用有機(jī)溶劑，不能用堿洗。使用時(shí)刻將微量注射器針頭稍磨平，操作時(shí)給予一定沖力，同時(shí)開啟冷風(fēng)邊點(diǎn)邊吹干。樣點(diǎn)滴加在薄層板上位置、距底、距側(cè)及兩點(diǎn)之間的距離均應(yīng)大于1.5cm，原點(diǎn)尖應(yīng)同一原始線上，大小應(yīng)基本一致。將活化點(diǎn)的薄層板放在點(diǎn)樣器上，對好距離，開啟背景燈，然后將吸有樣液的微量注射器固定好，開啟冷風(fēng)，然后輕輕壓下微量注射器邊點(diǎn)邊吸干，圓點(diǎn)直徑控制在3mm以內(nèi)。

4、 展開：將點(diǎn)好樣液的薄層板，放置在放有溶劑的展干燥缸中、使樣點(diǎn)在展開劑的移動(dòng)下進(jìn)行分層。

5、 顯色：熒光箱采用紫外光線照射法，使帶熒光的物質(zhì)可直接在紫外燈下觀察斑點(diǎn)位置。開啟燈箱后，即可適用，不需預(yù)熱。黃曲梅毒素低檢出量為0.0004微克，儀器觀察口涂有保護(hù)膜能有效地保護(hù)操作人員視力免受紫外光照射。